一、免疫沉淀概述
免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是一种纯化目的蛋白质,及抗原或抗体定性检测的常用方法。其基本原理基于“抗原-抗体”免疫反应,在蛋白提取液中加入某抗原(目的蛋白)特异的抗体,形成“抗原-抗体”的免疫复合物后,再与和免疫球蛋白(抗体)有高亲和性的Protein A/G beads孵育,纯化免疫复合物(图1)。纯化产物洗脱后即可进行SDS-PAGE及Western blotting分析,进而达到纯化目的蛋白质、定性检测抗原或抗体的目的。
图1:免疫沉淀原理
二、技术服务优势
1、使用特异性高的抗体,可以明显提高纯化产量及降低非特异性产物;
2、经济、快速,易于操作。
三、技术服务流程
图2:免疫沉淀技术服务流程
四、免疫沉淀技术服务内容
1、蛋白质抽提与定量;
2、免疫沉淀(以normal IgG作为对照);
3、免疫沉淀产物SDS-PAGE和western blot分析;
4、完整技术服务实验报告提交
五、顾客需准备的材料
1、组织、细胞、蛋白质溶液等样品,用于免疫沉淀的一抗(如果公司抗体库里没有),待测蛋白的相关信息等;
2、如需构建基因的过表达载体,则还需提供过表达载体及其相关信息,没有载体的本公司可以构建载体;
3、其他与免疫沉淀相关信息。
六、实验报告内容
1、免疫沉淀产物,电子图片及分析结果;
2、蛋白质鉴定结果,SDS-PAGE及western blot分析结果;
3、完整的实验步骤、使用仪器等。
七、实验服务周期及收费标准:咨询本公司
八、质量承诺:严谨的实验设计,确保免疫沉淀产物的高纯度。
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