一、双向电泳样本制备简要概述
双向电泳能否成功的首要因素是蛋白质样本的制备,不同类型的样本需采用不同的制备方法。双向电泳样本制备的主要原则是使蛋白质充分溶解,即需彻底破坏蛋白与蛋白、蛋白与非蛋白之间的共价与非共价相互作用。
本公司在动物组织,动物体液,植物组织,各类细胞,细菌,真菌,藻类,病毒,微生物分泌蛋白等双向电泳样本制作技术服务中积累了丰富的经验,能确保双向电泳样本的制备质量。
二、双向电泳裂解液组成
1、变性剂:破坏氢键等次级键,使肽链伸展、疏水中心暴露,如脲、硫脲等。
2、去垢剂:破坏蛋白间的疏水作用。如非离子去垢triton X-100和NP-40,两性离子去垢剂CHAPS,阴离子去垢剂SDS。若制备样本时使用了SDS,则需确保SDS的浓度在0.25%及以下,同时确保其他的去垢剂与SDS的比例至少为8:1。
3、还原剂:断裂二硫键,利于肽链的分离,如β-巯基乙醇,DTT等。
4、蛋白酶抑制剂:抑制蛋白酶活性,如PMSF(不可逆的抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶)、EDTA(通过螯合金属离子来抑制金属蛋白酶)、多肽蛋白酶抑制剂(可抑制多种蛋白酶)等。
三、双向电泳样本制备技术服务内容
样本制备;蛋白质定量;实验报告整理。
四、送样须知
样本应避免各类污染及反复冻融,妥善保存,用液氮或干冰保存寄送;广州本地客户可上门收样。
注:双向电泳系统可以分离多种类型的蛋白样本,如组织、细胞、细菌等材料,但不同类型的样本其需要的量不同,具体请咨询我司。
五、双向电泳样本制备实验服务报告内容
1、本公司可提供粉或溶液形式的蛋白质(可直接用于IEF);
2、蛋白质定量结果;
3、双向电泳样本制备实验步骤、使用仪器等。
六、实验周期及收费标准:请咨询我司
七、质量承诺:确保制备的蛋白样本能用于双向电泳。